Исследуемый материал
Сыворотка крови
Метод определения
Непрямая реакция иммунофлуоресценции (нРИФ).
Тест используют для подтверждения специфичности выявляемых антител к дсДНК.
Антитела к двуспиральной (нативной) ДНК являются серологическим маркером системной красной волчанки (СКВ) и обнаруживаются у 50-70% пациентов с данным заболеванием. Эти антитела участвуют в патогенезе волчаночного поражения почек. Титры анти-дсДНК тесно коррелируют с концентрацией IgG-содержащих иммунных комплексов в сыворотке крови больных СКВ и активностью болезни. Антитела к двуспиральной ДНК (анти-дсДНК) специфичны для СКВ, в отличие от антител к односпиральной ДНК (анти-осДНК), которые могут обнаруживаться при других аутоиммунных и инфекционных заболеваниях и не имеют существенной диагностической ценности. Они особенно значимы при достаточной пре-тестовой вероятности заболевания по клиническим признакам.
Традиционный рекомендуемый для скрининга анти-дсДНК метод исследования – иммуноферментный анализ (ИФА) – в некоторых случаях может давать неспецифические ложноположительные результаты, что связывают, в частности, с возможностью спонтанной денатурации и контаминации дсДНК молекулами односпиральной ДНК. Это может быть причиной ошибочной постановки диагноза системной красной волчанки. Для того чтобы избежать ошибочного диагноза, в соответствии с рекомендациями экспертов, целесообразно подтвердить полученный скрининговым ИФА-методом положительный результат теста анти-дсДНК с помощью альтернативного метода. Одним из таких способов служит выявление антител к двуспиральной ДНК методом непрямой иммунофлуоресценции с применением в качестве субстрата клеток простейшего Crithidia luciliae. Микроорганизм Crithidia luciliae имеет в составе кинетопласта жгутика большое количество стабильных кольцевых молекул дсДНК, лишенных односпиральных последовательностей и не ассоциированных с гистоновыми белками. Специфичность определения антител к дсДНК методом нРИФ с применением субстрата Crithidia luciliae для диагностики СКВ выше, чем методом ИФА.
Литература
- Александрова Е.Н., Новиков А.А., Насонов Е.Л. Рекомендации по лабораторной диагностике ревматических заболеваний Общероссийской общественной организации «Ассоциация ревматологов России». Современная ревматология. 2015;9(4):25-36.
- Лапин С.В., Тотолян А.А. Иммунологическая лабораторная диагностика аутоиммунных заболеваний. - СПб.: Изд. «Человек». 2010:272.
- Kavanaugh A.F., Solomon D.H. Guidelines for Immunologic Laboratory Testing in the Rheumatic Diseases: Anti-DNA Antibody Tests. Arthritis & Rheumatism (Arthritis Care & Research). 2002;47(5):546-555. DOI 10.1002/art.10558