Метод определения
Метод Вестерн-блота.
Зерттелетін материал
Сыворотка крови
Высокоспецифичный тест диагностики и мониторирования H. pyloi - ассоциированного гастрита и язвенной болезни желудка и 12-перстной кишки.
Метод Вестерн-блота для определения антител к H. Pylori, в отличие от обычного ИФА, даёт дифференцированные сведения о наличии антител к целому спектру антигенов возбудителя. Это достигается электрофоретическим разделением белков экстракта H. Pylori. В результате выявляется порядка 15 антигенов (полный антиген), что значительно повышает информативность исследования.
Использующиеся в анализе антигены разделяют на три категории:
- 1 категория - перекрёстнореагирующие и неопределённые антигены;
- 2 категория - уреаза В (антиген с м.в. 66 кДа);
- 3 категория - видоспецифичные и высокоспецифичные антигены.
Данная диагностическая система прямо отличает специфические антигены от неспецифических. Поэтому вестерн-блот метод гарантирует высокую специфичность исследования.
Клинические изоляты H. Pylori можно разделить на 2 типа. Штаммы H. pylori I типа могут экспрессировать специфический вакуолизирующий цитотоксин (VacA) и цитотоксин-ассоциированный белок (CagA). Штаммы, не способные синтезировать этот белок, относят к типу II. Инфекции, вызванные агентом I типа, оказываются более патогенными, клинические симптомы включают гастрит и образование язв, возможны отдалённые последствия в виде злокачественной лимфомы и аденокарциномы желудка. Указанные белки входят в состав специфических антигенов, используемых для тестирования антител к H. Pylori методом иммуноблота, что также даёт дополнительную информацию для специалистов.
Состав используемых для выявления антител к H. Pylori специфических антигенов:
| АНТИГЕН | СПЕЦИФИЧНОСТЬ |
| CagA p120 | белок, ассоциированный с цитотоксином А, высокоспецифичен |
| VacA p95 | вакуолизирующий цитотоксин А, высокоспецифичен |
| p75 | неспецифичен |
| FSH p57 | белок жгутиковых, неспецифичен, обуславливает перекрёстную реактивность с другими бактериями, содержащими уреазу |
| Ure B p66 | тяжёлая субъединица уреазы, обуславливает перекрёстную реактивность с другими бактериями, содержащими уреазу |
| гомолог HSP p57 | гомолог белка теплового шока, неспецифичен |
| флагеллин p54 | неспецифичен, обуславливает перекрёстную реактивность с другими бактериями, содержащими флагеллин |
| p50 | неспецифичен |
| p41 | неспецифичен |
| p33 | предположительно специфичен |
| CMP p30 | Белок наружной мембраны, видоспецифичен |
| UreA p29 | лёгкая субъединица уреазы, высокоспецифичен |
| p26 | высокоспецифичен |
| CMP p19 | белок наружной мембраны, видоспецифичен |
| p17 | предположительно специфичен |
Антитела класса IgA появляются спустя некоторое время после контакта с H. Pylori. Этот тип антител (секреторные антитела), характерен больше для слизистых оболочек, где они образуются локально и обеспечивают местную защиту. IgA не всегда обнаруживаются в крови. Положительные результаты по IgA к H. Pylori хорошо коррелируют с активностью гастрита, считается, что повышенный титр IgA может выполнять роль маркёра хронической инфекции.
Әдебиет
- Жебрун А.Б., Лазебник Л.В., Щербаков П.Л. и соавт. Диагностика и лечение заболеваний желудочно-кишечного тракта, ассоциированных с инфекцией Helicobacter pylori (практическое руководство для врачей). – Санкт-Петербург – Биоград, 2006.
- D Vaira, J Holton, M Menegatti, et al. New immunological assays for the diagnosis of Helicobacter pylori infection. Gut . 1999; 45 (Suppl 1): pp. I23 - I27.
- Материалы фирмы – производителя реагентов.