Дифференцированное выявление ДНК Bordetella species: Bordetella pertussis (возбудитель коклюша) и Bordetella bronchiseptica (возбудитель бронхосептикоза) в соскобе эпителиальных клеток слизистой ротоглотки и/или носоглотки

Сипаттама

Метод определения ПЦР с детекцией в режиме реального времени.

Зерттелетін материал Соскоб эпителиальных клеток ротоглотки и/или носоглотки

Дифференцированное определение ДНК возбудителей коклюша (Bordetella pertussis) и бронхосептикоза (Bordetella bronchiseptica) в соскобе эпителиальных клеток слизистой носоглотки и/или ротоглотки методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме реального времени, а также общего гена Bordetella species, включающего Bordetella parapertussis и другие виды рода Bordetella.

Диагностическая чувствительность и специфичность: 100%.

Коклюш – это острая воздушно-капельная инфекция, вызываемая микроорганизмами вида Bordetella pertussis, характеризуемая поражением слизистой оболочки преимущественно гортани, трахеи, бронхов и развитием судорожного приступообразного кашля.

Коклюш относят к детским инфекциям, однако в возрастной структуре в последние годы преобладают подростки и взрослые, которые в большинстве случаев переносят коклюш в атипичной форме. У грудных невакцинированных детей коклюш протекает очень тяжело и представляет прямую угрозу для жизни.

Входными воротами инфекции служит слизистая оболочка респираторного тракта. Палочки коклюша проявляют строгий тропизм к клеткам мерцательного эпителия, прикрепляются к ним и размножаются на поверхности слизистой оболочки, не проникая в кровоток. Размножение обычно происходит на протяжении 2-3 недель и сопровождается выделением ряда сильных экзотоксинов, основными из них являются КТ (коклюшный токсин) и аденилатциклаза, которые способствуют развитию патологического процесса (воспаление, увеличение секреции слизи, появление изъязвлений эпителия дыхательных путей, очаговый некроз).

Коклюш относится к числу заболеваний с циклическим течением. Выделяют четыре последовательных периода: инкубационный, продолжительность которого составляет 3-14 дней (в среднем 7-8 дней); катаральный, или предсудорожный (10-13 дней); судорожный, или спазматический (1-1,5 недели у иммунизированных детей и до 4-6 недель у непривитых), период реконвалесценции (ранний – развивающийся через 2-8 недель от начала клинических проявлений и поздний – спустя 2-6 месяцев).

Заболевание продолжается минимум две недели без явлений интоксикации и повышения температуры тела, протекает с приступообразным кашлем, усиливающимся ночью и по утрам. Кашель сопровождается покраснением лица, шумными вдохами (репризами), которые заканчиваются отхождением вязкой слизи или рвотой в конце приступа.

Bordetella bronchiseptica – возбудитель бронхосептикоза – поражает главным образом домашних животных, а также людей, инфицирующихся при контакте с больными животными. Бронхосептикоз у людей протекает в виде ОРЗ с приступами сухого кашля, особенно перед сном.

Лабораторная диагностика коклюша и коклюшеподобных заболеваний приобретает особую значимость в связи с трудностью клинического распознавания и в настоящее время является важным звеном в системе противоэпидемических мероприятий.

Бактериологический метод является «золотым стандартом» лабораторной диагностики, позволяет выделить культуру возбудителя на питательной среде и идентифицировать возбудителя до вида. Но успешен он только в ранние сроки заболевания – первые 2 недели.

Серодиагностика (выявление противококлюшных антител) может быть применена на более поздних сроках, начиная со 2-й недели заболевания. При наличии типичных клинических проявлений она позволяет лишь подтвердить диагноз, в то время как при стертых и атипичных формах серодиагностика может оказаться решающей в выявлении заболевания.

ПЦР является высокочувствительным, специфичным и быстрым методом, который может быть использован в разные сроки заболевания даже на фоне приема антибиотиков при выявлении атипичных и стертых форм коклюша. Наиболее информативным считается период 1-4 недели от начала заболевания. Наличие в анамнезе вакцинации против коклюша не влияет на результаты ПЦР.

Әдебиет

МР 3.1.2.0072-13. Диагностика коклюша и паракоклюша.
Николаева И.В., Шайхиева Г.С. Коклюш на современном этапе. Вестник современной клинической медицины. 2016;9(2):25-29. DOI: 10.20969/VSKM. 2016;9(2):25-29.
Прадед М.Н., Яцышина С.Б., Селезнева Т.С., Малинина С.В., Бирюлева Н.В., Любимова Т.Е., Воробьева Н.С. ПЦР-диагностика инфекций, вызванных B. pertussis, B. parapertussis и B. bronchiseptica. Клиническая лабораторная диагностика. 2013;(1):53-56.
Тюкавкина С.Ю., Харсеева Г.Г. Коклюш: эпидемиология, биологические свойства Bordetella pertussis, принципы лабораторной диагностики и специфической профилактики. Эпидемиология и инфекционные болезни. 2014;19(4):50-60.
Инструкция по применению набора реагентов для выявления ДНК Bordetella species с дифференциацией видов Bordetella pertussis и Bordetella bronchiseptica методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени АО «Вектор-Бест».
Методические указания МУК 4.2.3701-21 «Лабораторная диагностика коклюша и заболеваний, обусловленных другими бордетеллами».
Коклюш у детей. Клинические рекомендации. Одобрены Научно-практическим советом Минздрава России, 2019.

Дайындық

Взятие материала желательно проводить до диагностических и лечебных манипуляций в предполагаемом месте локализации возбудителя.

При подготовке пациента к процедуре следует учесть:

за 6 часов до исследования не рекомендуется использовать лекарственные средства для орошения ротоглотки и препараты для рассасывания;
непосредственно перед взятием биологического материала не рекомендуется использовать жевательную резинку/пастилки для освежения дыхания;
непосредственно перед взятием биоматериала прополоскать полость рта питьевой водой комнатной температуры;
если полость носа заполнена слизью, перед процедурой рекомендуется провести высмаркивание.

Желательно соблюдать все описанные условия, если лечащим врачом не рекомендовано иное.

Тағайындау көрсеткіштері

для лабораторного подтверждения заболевания коклюшем и бронхосептикозом;
при приступообразном кашле продолжительностью более 5-7 дней у детей;
по эпидемиологическим показаниям (лицам, бывшим в контакте с больными коклюшем).

Нәтижелерді түсіндіру

Зерттеу нәтижелерін түсіндіру емдеуші дәрігерге арналған ақпаратты қамтиды және диагноз қойылмайды. Бұл бөлімдегі ақпаратты өзін-өзі диагностикалау және өзін-өзі емдеу үшін пайдалану мүмкін емес. Нақты диагнозды дәрігер осы тексерудің нәтижелерін де, басқа көздерден қажетті ақпаратты да қолдана отырып қояды: анамнез, басқа тексерулердің нәтижелері және т. б.

Единицы измерения:

Тест качественный, включает суммарный ответ по Bordetella species и отдельно по Bordetella pertussis и Bordetella bronchiseptica

Референсные значения: нет.

Форма представления результата

Результат выдается в терминах «обнаружено» или «не обнаружено»

Трактовка результатов исследования

Обнаружено:

В анализируемом образце биологического материала обнаружены фрагменты ДНК специфичные для Bordetella species и Bordetella pertussis
В анализируемом образце биологического материала обнаружены фрагменты ДНК специфичные для Bordetella species и Bordetella bronchiseptica
В анализируемом образце биологического материала обнаружены фрагменты ДНК специфичные для Bordetella species

Инфекция, вызванная соответствующим возбудителем.

Носительство возбудителя инфекции.

Не обнаружено

В анализируемом образце биологического материала не обнаружено фрагментов ДНК, специфичных для Bordetella species/Bordetella pertussis/Bordetella bronchiseptica

Отсутствие ДНК возбудителя в исследуемом материале.

Уровень ДНК возбудителя в исследуемом материале ниже границы чувствительности тест-системы

Результат «не обнаружено» по видам Bordetella pertussis и Bordetella bronchiseptica, но «обнаружено» по Bordetella species свидетельствует, что в пробе присутствует ДНК других видов из рода Bordetella (исключая Bordetella pertussis и Bordetella bronchiseptica).

Определяемые виды Bordetella species :

Bordetella avium, Bordetella bronchialis, Bordetella bronchiseptica, Bordetella flabilis, Bordetella hinzii, Bordetella holmesii, Bordetella muralis, Bordetella parapertussis, Bordetella pertussis, Bordetella petrii, Bordetella pseudohinzii, Bordetella sputigena, Bordetella trematum, Bordetella tumbae, Bordetella tumulicola)