Скрининг возбудителей гельминтозов. Острица, определение ДНК в кале

Синонимы: Анализ кала на энтеробиоз методом ПЦР.

Screening of parasitic invasions. Еnterobius vermicularis, PCR, Fecal.

Краткое описание исследования «Скрининг возбудителей гельминтозов. Острица, определение ДНК в кале»

Что такое энтеробиоз?

Энтеробиоз – это одна из наиболее распространенных гельминтных инфекций, возможная в разном возрасте, но чаще встречающаяся у детей. Возбудитель энтеробиоза – острица (Enterobius vermicularis) – круглый раздельнополый гельминт веретенообразной формы молочно-белого цвета.

Острицы паразитируют только в организме человека. Развитие энтеробиоза происходит при проглатывании зрелых яиц остриц, в которых содержатся подвижные личинки. Поскольку яйца очень мелкие, иногда возможно их заглатывание с пылевыми частицами даже при дыхании.

Возбудитель может передаваться от человека к человеку через:

• загрязненные поверхности;
• игрушки;
• постельные принадлежности;
• одежду.

Взрослые острицы обитают в нижнем отделе тонкой кишки, в слепой кишке и в верхнем отделе толстой кишки. Питаются гельминты преимущественно содержимым кишечника и являются факультативными гематофагами.

Цикл размножения остриц

Под действием пищеварительных ферментов тонкого кишечника личинки высвобождаются из яиц, опускаются в нижние его отделы, где проходят 2-3 линьки, и через две недели превращаются в половозрелых особей. После копуляции самцы погибают, а самки остриц прикрепляются к слизистой оболочке кишечника. После оплодотворения самка откладывает в перианальных складках огромное количество яиц (до 13 000), после чего погибает. Для развития яиц необходим особый микроклимат с температурой 34-36°С и высокой влажностью (70-90%), который поддерживается в перианальных складках. Яйца достигают инвазионной зрелости через несколько часов после откладывания. В кишечнике внутри яиц созревают личинки, которые в течение 2-4 недель развиваются во взрослых особей. Затем цикл повторяется.

Как происходит заражение острицами

Человек испытывает сильный зуд и расчесывает кожу, в результате чего яйца остриц попадают на руки и под ногти, а затем – на продукты, воду, мебель, игрушки и другие бытовые предметы. При несоблюдении гигиенических норм происходит аутоинвазия. Яйца остриц нередко обнаруживаются на шерсти домашних животных, а также в домашней пыли.

Патогенное действие остриц

Острицы вызывают механическое повреждение слизистой оболочки кишечника в результате присасывания к ней. Продукты обмена гельминтов вызывают сенсибилизацию организма с развитием аллергии. У пациентов, инвазированных небольшим количеством остриц, проявления болезни могут отсутствовать. В большинстве же случаев развиваются те или иные симптомы.

Симптомы энтеробиоза

При легкой форме энтеробиоза легкий зуд в перианальной области присутствует в вечернее время.

При большом количестве остриц и реинвазии зуд становится постоянным и очень мучительным. Расчесывание кожи вокруг анального отверстия приводит к образованию ссадин, вторичной бактериальной инфекции кожи, возникновению дерматитов, что отягощает течение болезни.

У некоторых пациентов выраженным симптомом энтеробиоза становятся кишечные расстройства:

• диарея, иногда с примесью слизи;
• раздражение слизистой наружного и внутреннего сфинктеров.

Описаны энтеробиозные аппендициты, обусловленные сочетанием инвазии острицами со вторичной бактериальной инфекцией.

При тяжелой форме заболевания часто возникают:

• головная боль;
• головокружение;
• бессонница;
• повышенная умственная и физическая утомляемость.

Лабораторные методы диагностики энтеробиоза

Существующая диагностика гельминтозов, основанная на микроскопическом исследовании образцов кала человека на наличие яиц паразитов, имеет ряд недостатков, в частности, недостаточно высокую чувствительность, особенно на ранних стадиях развития паразита. Поэтому своевременная верификация диагноза требует разработки и внедрения новых молекулярно-биологических методов исследования, таких как ПЦР и MALDI–TOFMS.

Метод ПЦР:

• позволяет обнаружить ДНК паразитов за один цикл;
• обеспечивает высокую специфичность и чувствительность анализа, существенно сокращая время его проведения;
• позволят провести видовую дифференцировку возбудителей даже на ранних стадиях болезни.

Точность ПЦР-анализа при обнаружении гельминтов в сравнении с микроскопией варьирует от 91% до 100% и позволяет выявлять многих паразитов, за исключением нематод (ложноотрицательные результаты возможны до 20% случаев).

Использование высокочувствительного, быстрого и масштабируемого метода ПЦР может иметь важное значение:

• в диагностике геогельминтозов;
• в оценке интенсивности инфекции;
• в мониторинге эффективности лечения.

Аналитические показатели:

• определяемый фрагмент – специфичный участок ДНК Enterobius vermicularis;
• специфичность определения – 100%;
• чувствительность определения – 1,2х10^3 копий/мл исходного образца.

При подозрении на энтеробиоз предпочтительным материалом для исследования является соскоб с поверхности перианальных складок (см. тест № 1601ОСТ). Соскоб не подходит для выполнения ПЦР-исследования.

При обнаружении пациентом в фекалиях фрагментов плоских червей или особей круглых червей для их идентификации необходимо обращаться в региональный Центр эпидемиологии и гигиены или в инфекционную больницу.

С какой целью выполняют исследование

Молекулярно-генетические исследования (в т. ч. ПЦР-метод), выявляющие специфические фрагменты ДНК возбудителей в биоматериале, входят в стандартные схемы диагностики гельминтозов и позволяют быстро и эффективно верифицировать возбудителей этих заболеваний.

Что следует учесть при выполнении исследования

Нарушение правил подготовки к исследованию может повлиять на результаты тестов.

Литература

1. Лабораторная диагностика гельминтозов и протозоозов: Методические указания. - М.: ФБУЗ «Федеральный центр гигиены и эпидемиологии» Роспотребнадзора. - 154 с.
2. Методические рекомендации МР 3.1.0409-25 "Эпидемиологический надзор за энтеробиозом" (утв. Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека 29 декабря 2025 г.).
3. Мусыргалина Ф. Ф. Медицинская паразитология: учеб. пособие //Уфа: Изд-во ФГБЩУ ВО БГМУ Минздрав России. – 2018. – С. 279.
4. Ющук Н. Д., Венгеров Ю. Я. Инфекционные болезни: национальное руководство. 3-е издание. – 2021.
5. Autier B., Gangneux J. P., Robert-Gangneux F. Evaluation of the Allplex™ GI-Helminth (I) Assay, the first marketed multiplex PCR for helminth diagnosis //Parasite. – 2021. – Т. 28.
6. Keller L. et al. Performance of the Kato-Katz method and real time polymerase chain reaction for the diagnosis of soil-transmitted helminthiasis in the framework of a randomised controlled trial: treatment efficacy and day-to-day variation //Parasites & vectors. – 2020. – Т. 13. – №. 1. – С. 1-12.
7. Rawla P., Sharma S. Enterobius vermicularis //StatPearls [Internet]. – StatPearls Publishing, 2021.
8. Wendt S. et al. The diagnosis and treatment of pinworm infection //Deutsches Ärzteblatt International. – 2019. – Т. 116. – №. 13. – С. 213.

Правила подготовки к исследованию

Кал должен быть свежесобранным.

Кал собрать в одноразовый контейнер с завинчивающейся крышкой и ложечкой (заранее взять в любом медицинском офисе под залог) в количестве не более 1/3 объема контейнера.

Материал доставить в медицинский офис в день сбора.

На контейнере указать фамилию, инициалы, дату рождения пациента, дату и время сбора материала разборчивым почерком.

В направительном бланке обязательно должен быть указан диагноз и дата начала заболевания, сведения о приёме антибиотиков. При взятии материала необходимо соблюдать стерильность.

Материал после окончания исследования в лаборатории не хранится.

С инструкцией по сбору материала можно ознакомиться здесь.

Показания для анализа «Скрининг возбудителей гельминтозов. Острица, определение ДНК в кале»:

• подозрение на инвазию Enterobius vermicularis.

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Единицы измерения: тест качественный.

Референсные значения: не обнаружено.

Формат представления результата

Результат выдается в терминах «обнаружено» или «не обнаружено».

Интерпретация результатов исследования «Скрининг возбудителей гельминтозов. Острица, определение ДНК в кале»

Обнаружено

В анализируемом образце биологического материала найден фрагмент ДНК, специфичный для Enterobius vermicularis, инфицирование Enterobius vermicularis.

Не обнаружено

В анализируемом образце биологического материала не обнаружено фрагментов ДНК, специфичных для Enterobius vermicularis, или концентрация возбудителя в образце ниже границы чувствительности метода.