Волчаночный антикоагулянт, расширенное исследование (Lupus Anticoagulant Profile)

Синонимы: Волчаночный антикоагулянт (ВА), панель тестов с ядом гадюки Рассела и кварцевым активатором.

Lupus Anticoagulant (LA) Panel – dRVTT, SCT.

Состав исследования:

1. Тест с разведенным ядом гадюки Рассела (dRVTT) включает выполнение скринингового теста, при выходе результата за предел нормы – последовательный алгоритм тестов смешивания (добавление нормальной плазмы) и подтверждения (добавление избытка фосфолипидов), выполняемых на основе тест-системы dRVTT, с расчетом нормализованного отношения и формированием заключения по результатам исследования волчаночного антикоагулянта (ВА) в данном тесте.
2. Исследование времени свертывания с кварцевым активатором (SCT) включает выполнение скринингового теста, при выходе результата за предел нормы – последовательный алгоритм тестов смешивания (добавление нормальной плазмы) и подтверждения (добавление избытка фосфолипидов), выполняемых на основе тест-системы SCT, с расчетом нормализованного отношения и формированием заключения по результатам исследования ВА в данном тесте.
3. Заключение по результатам исследования ВА на основе применения двух тест-систем.

Краткое описание исследования «Волчаночный антикоагулянт, расширенное исследование»

Волчаночный антикоагулянт (ВА) – разновидность антифосфолипидных (нацеленных на фосфолипиды и ассоциированные с ними белки) аутоантител, которые интерферируют с механизмами свертывания крови. Наличие ВА связано с повышенным риском тромбозов на уровне организма, но проявляется феноменом удлинения времени свертывания в ряде лабораторных коагулологических тестов, зависимых от фосфолипидов. Название волчаночного антикоагулянта вдвойне условно. Волчаночными антикоагулянтами эти антитела назвали, поскольку первоначально их выявили у пациентов с системной красной волчанкой (СКВ), хотя они могут встречаться и у пациентов с первичным антифосфолипидным синдромом, без СКВ. Наименование антикоагулянт отражает лабораторный феномен, а не клинический эффект этого вида антител.

Антифосфолипидный синдром

Антифосфолипидный синдром (АФС) – приобретенная тромбофилия, аутоиммунное заболевание, характеризующееся рецидивирующими тромбозами любой локализации и калибра, акушерской патологией (чаще синдром потери плода), связанное с персистирующей продукцией антител к фосфолипид-связывающим белкам.

АФС диагностируется на основании комплекса клинических и лабораторных критериев. Волчаночный антикоагулянт – один из трех лабораторных критериев антифосфолипидного синдрома (АФС), которые применяют в комплексной диагностике этой патологии. В отличие от двух других лабораторных критериев АФС (антитела к кардиолипину и антитела к бета-2-гликопротеину 1), выявление ВА не подразумевает определение концентрации специфических антител. Это функциональный коагулологический тест, который позволяет выявить циркулирующие в крови антифосфолипидные антитела по удлинению показателей фосфолипидзависимых коагуляционных тестов.

Выявление волчаночного антикоагулянта

Вследствие многообразия разновидностей антифосфолипидных антител, а также поскольку удлинение свертывания в коагулологических тестах может иметь, помимо ВА, и другие причины (иные ингибиторы свертывания, дефицит факторов свертывания, применение антикоагулянтов, влияние некоторых острофазных факторов) подтверждение присутствия ВА в крови пациента является непростой задачей. Соответственно рекомендациям экспертов (ISTH – International Society on Thrombosis and Haemostasis, Международное общество по тромбозам и гемостазу, 2020), для более надежного выявления ВА следует применять две чувствительные к ВА, но основанные на разном принципе, тест-системы, с последовательным алгоритмом, включающим три стадии:

1) скрининговый тест;

2) микс-тест – постановка того же теста после предварительного смешивании плазмы пациента 1:1 с нормальной плазмой;

3) подтверждающей тест – подтверждение природы выявленных сдвигов путем выполнения теста в условиях избытка фосфолипидов.

Дополнительные стадии смешивания и подтверждения, которые выполняют при удлиненном результате скринингового теста, помогают отличить наличие ВА от дефицита факторов свертывания или присутствия иных ингибиторов свертывания. При получении начально положительного результата ВА в таком исследовании, необходимо повторить его, через минимум 12 недель, для подтверждения устойчивого присутствия ВА.

В дополнение к исследованию ВА следует использовать тесты на антитела классов IgM и IgG к кардиолипину и к бета-2-гликопротеину 1 (см. тесты №№ 969, 997, 1670, 1671), которые позволяют выявить иные клинически значимые виды антифосфолипидных антител, ассоциированных с АФС. Пациенты с АФС, у которых выявляется положительный результат по всем трем лабораторным критериям, имеют более высокие риски образования тромбов, однако, чаще тромбозы отмечаются у лиц с наличием ВА.

С какой целью выполняют исследование

Исследование проводят с целью определения риска при обследовании пациентов с вероятностью наличия АФС.

Что может повлиять на результат исследования

При назначении и выполнении исследования ВА очень важно учитывать применяемую лекарственную терапию. Различные виды антикоагулянтов и других лекарств, которые способны влиять на свертывание крови (подробнее см. раздел Подготовка к исследованию), могут приводить как к ложноположительным, так и ложноотрицательным результатам теста. В идеале, исследование ВА следует проводить у пациентов, не получающих какую-либо антикоагулянтную терапию. Указание информации о применении пациентом антикоагулянтов при направлении на исследование ВА является обязательным.

Следует учитывать, что острофазные реактанты (FVIII, СРБ) при выполнении исследования ВА вскоре после тромботических событий могут приводить как к ложноположительному, так и ложноотрицательному результату, хотя исследование ВА может быть полезным для диагностики и выбора терапии в таких ситуациях.

Проведение теста во время беременности может приводить к ложноположительным или ложноотрицательным результатам, такие результаты следует интерпретировать с осторожностью и повторить исследование в соответствующее время после родов.

Литература

1. Вавилова Т. В. и др. Диагностика антифосфолипидного синдрома у лиц с клиническими критериями заболевания. Опыт отдельного амбулаторного центра //Атеротромбоз. – 2019. – №. 1. – С. 92-98.
2. Клинические рекомендации. Венозные осложнения во время беременности и послеродовом периоде. Акушерская тромбоэмболия. – 2022.
3. Клинические рекомендации. Системная красная волчанка. – 2024.
4. Кобилянская В. А. Определений волчаночного антикоагулянта у пациентов на фоне приема ривароксабана //Вестник гематологии. – 2018. – Т. 14. – №. 1. – С. 47-48.
5. Шпилюк М.А., Белова К.В., Кречетова Л.В. Особенности определения волчаночного антикоагулянта на примере клинического случая //Мать и дитя. – 2024. – Т. 3 – №. 41, – С. 8-10.
6. Barbhaiya M. et al. The 2023 ACR/EULAR antiphospholipid syndrome classification criteria //Arthritis & Rheumatology. – 2023. – Т. 75. – №. 10. – С. 1687-1702.
7. Devreese K. M. J. et al. Guidance from the Scientific and Standardization Committee for lupus anticoagulant/antiphospholipid antibodies of the International Society on Thrombosis and Haemostasis //Journal of thrombosis and haemostasis. – 2020. – Т. 18. – №. 11. – С. 2828-2839.
8. Favaloro E. J., Pasalic L. Lupus anticoagulant testing during anticoagulation, including direct oral anticoagulants //Research and practice in thrombosis and haemostasis. – 2022. – Т. 6. – №. 2. – С. e12676.
9. Информация фирмы-производителя реагентов.

Правила подготовки к исследованию

Несмотря на то, что исследование волчаночного антикоагулянта может быть клинически желательным у пациентов, получающих антикоагулянты, следует принимать во внимание следующие моменты:

• У пациентов, получавших антагонисты витамина К, интерпретация результатов ВА затруднена из-за исходно увеличенного времени свертывания крови. По возможности, следует провести тестирование ВА через 1-2 недели после прекращения приема таких препаратов, с обсуждением возможности переключения на низкомолекулярные гепарины (НМГ).
• Если пациенты проходят тестирование во время лечения НМГ, образцы должны быть взяты по возможности, по крайней мере, через 12 часов после введения последней дозы НМГ и как можно ближе к приему следующей дозы, с проверкой уровня анти-Ха-активности (см. тест № 1412), наряду с исследованием ВА.
• Если возможно временно прервать антикоагулянтную терапию прямыми оральными антикоагулянтами (на эмпирической основе, по крайней мере, через 48 часов после приема последней дозы, а у пациентов с нарушением функции почек – и дольше), можно провести тестирование ВА, с одновременной проверкой уровня этих препаратов (см. тесты №№ 1415, 1416), наряду с тестом на ВА.

Примечания

В обязательном порядке следует заполнить анкету: указать текущее или недавнее (7 дней) применение лекарственных препаратов, влияющих на свертывание, и трансфузий – нет/да (и время последнего приема):

• Антикоагулянты непрямого действия – антагонисты витамина К, производные кумарина (Варфарин и др.) -
• Прямые ингибиторы тромбина (Прадакса, Аргатробан, Бивалирудин) -
• Гепарин (нефракционированный) -
• Низкомолекулярные гепарины (Эноксапарин, Далтепарин и др) -
• Фондапаринукс -
• Прямые Xa-ингибиторы (Ксарелто, Эликвис, Ликсиана) -
• Тромболитическая терапия -
• Переливания крови, плазмы, заместительная терапия концентратами факторов в последние 3 суток – нет/да (указать вид).
• Особые отметки (установленные ранее врожденные нарушения коагуляции, наличие ингибитора свертывания) -

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Единицы измерения: без единиц.

Результат выдается в виде отношения к времени свертывания нормальной плазмы или нормализованного отношения результатов скрининг/подтверждающий.

Референсные значения

Скрининговый тест dRVTT: ≤1.2.

Скрининговый тест SCT: ≤1.16.

Трактовка результатов исследования «Волчаночный антикоагулянт, расширенное исследование»

Интерпретация результатов 3-ступенчатого алгоритма с использованием двух тест-систем:

• Скрининговые тесты – результаты выдаются в виде отношения к времени свертывания нормальной плазмы, удлинение свертывания в скрининговых тестах (dRVTT: >1.2, SCT: >1.16) свидетельствует о подозрении на наличие ВА (при отсутствии иных причин удлинения).
• Тесты смешивания с нормальной плазмой (микс-тесты) – выполняются при удлинении свертывания в соответствующем скрининговом тесте: результаты выдаются в виде отношения к времени свертывания нормальной плазмы. Нормализация времени свертывания при смешивании плазмы пациента 1:1 с пулированной нормальной донорской плазмой (dRVVT микс скрининг ≤1.2, SCT микс скрининг ≤1.16) указывают на возможный дефицит факторов свертывания в плазме пациента – приобретенный или врожденный.
• Подтверждающие тесты (на фоне избытка фосфолипидов) – выполняются при удлиненном результате соответствующего скринингового теста: результаты выдаются в виде отношения к времени свертывания нормальной плазмы. Интерпретация проводится по нормализованному отношению скрининг/подтверждающий – нормализация удлиненного при скрининге времени свертывания на фоне добавления избытка фосфолипидов подтверждает вероятность наличия антифосфолипидных антител (волчаночного антикоагулянта). dRVVT нормализованное отношение скрининг/подтверждаюший >1.2, SCT нормализованное отношение скрининг/подтверждаюший >1.16 служат подтверждением наличия ВА.
• В ситуации, когда dRVVT подтверждающий или SCT подтверждающий удлинены относительно времени свертывания нормальной плазмы (dRVTT подтверждающий >1.2, SCT подтверждающий >1.16), дополнительно выполняется dRVVT подтверждающий-микс или SCT подтверждающий-микс на смеси пробы пациента 1:1 с пулированной нормальной донорской плазмой, Интерпретация в таких ситуациях проводится по нормализованному отношению скрининг-микс/подтверждающий-микс (dRVVT нормализованное отношение скрининг-микс/подтверждаюший-микс >1.2, SCT нормализованное отношение скрининг-микс/подтверждаюший-микс >1.16 служат подтверждением вероятного наличия ВА).
• Заключение. На основании результатов применения 2 тест-систем с 3-ступенчатым алгоритмом подтверждения при удлинении времени свертывания в скрининговых тестах, и с учетом предоставленной информации по текущему приему антикоагулянтов, формируется заключение о наличии ВА (положительный/отрицательный) в dRVVT и SCT тестах, а также общее заключение.

При получении положительного результата необходимо повторить исследование по меньшей мере через 12 недель для подтверждения устойчивого присутствия ВА.