Обнаружение маннанового антигена Candida в сыворотке/плазме человека иммуноферментным методом (Platelia Candida mannan antigen)

Синонимы: Анализ крови на маннановый антиген.

Detection Candida mannan antigen, serum/plasma, enzyme-linked immunosorbent assay; Anti-mannan antigen.

Краткое описание исследования «Обнаружение маннанового антигена Candida в сыворотке/плазме человека иммуноферментным методом»

Инвазивный кандидоз – тяжелая грибковая инфекция, вызванная грибами рода Candida, основными вариантами которой являются кандидемия и острый диссеминированный кандидоз. Заболевание характеризуется тяжестью клинических проявлений с высокой (30-70%) летальностью.

Хронический (гепатолиенальный) кандидоз встречается, как правило, у гематологических пациентов после длительного агранулоцитоза. Клинические признаки неспецифичны, возникают после завершения агранулоцитоза. На КТ, МРТ или УЗИ печени и/или селезенки выявляют очаговые изменения или абсцессы. Протекает длительно, в течение месяцев, возможны рецидивы при последующих эпизодах агранулоцитоза.

Основной метод диагностики инвазивного кандидоза – это микробиологическое исследование крови и стерильного биоматериала. Чувствительность посевов невысокая: только в 50% случаев при наличии инвазивного кандидоза выделяют культуры микромицета. Поэтому в качестве скринингового теста для ранней диагностики, в особенности у пациентов с поражением печени и селезенки, возможно использовать Platelia™ Candida Ag Plus в сыворотке/плазме крови. Чувствительность Platelia™ Candida Ag Plus в сыворотке/плазме крови у больных ИК – 58%, специфичность – 93%. Низкая концентрация маннана связана с быстрой элиминацией маннанового антигена из крови во время инфекции. Повышение диагностической эффективности теста можно достичь в сочетании с тестом Platelia™ Candida Ab Plus. Чувствительность такого комплексного исследования – 83%, специфичность – 86%. Чувствительность теста варьирует в зависимости от вида Candida (выше для C. albicans, N. glabratus, C. tropicalis).

Ложноположительные результаты возможны пациентов, получающих плазмозаменители, в образцах с концентрацией гамма-глобулинов выше или равно 60 г/л или с положительным результатом при тестировании на антитела к токсоплазме.

Данный метод также широко применяется при подозрении на хронический диссеминированный кандидоз. Необходимо помнить, что появление мананна и антимананновых антител Candida опережают на 6-7 дней̆ получение гемокультуры Candida spp. и на 16 дней̆ – радиологические признаки.

С какой целью выполняют исследование

Применяется как вспомогательный метод диагностики хронического диссеминированного (гепатолиенального) кандидоза (ХДК) у гематологических пациентов с длительной нейтропенией.

Что следует учесть при выполнении исследования

Является вспомогательным методом диагностики инвазивного кандидоза (ИК) и хронического диссеминированного кандидоза (ХДК).

Platelia™ Candida Ag Plus – иммуноферментный сэндвич-анализ с использованием моноклональных антител к маннановому антигену Candida, сорбированных на микропланшете и меченых пероксидазой в составе конъюгата. Концентрацию маннана (pg/ml) определяют по калибровочной кривой, построенной по стандартным растворам, входящим в состав набора. Для этого измеряют величину оптической плотности образца (ОП) и стандартов при длине волны 450 нм.

Литература

1. Клинические рекомендации. Лимфома маргинальной зоны. – 2023.
2. Куцевалова О. Ю. и др. Значение разработки новых маннановых тестов в диагностике инвазивного кандидоза у онкологических больных //Южно-Российский онкологический журнал. – 2021. – Т. 2. – №. 3. – С. 42-47.
3. Akın H. et al. The Usefulness of Mannan Antigen and Anti-mannan Anti-body in the Diagnosis of Candidemia. – 2023.
4. Cornely O. A. et al. Global guideline for the diagnosis and management of candidiasis: an initiative of the ECMM in cooperation with ISHAM and ASM //The Lancet Infectious Diseases. – 2025.
5. Donnelly J. P. et al. Revision and update of the consensus definitions of invasive fungal disease from the European Organization for Research and Treatment of Cancer and the Mycoses Study Group Education and Research Consortium //Clinical Infectious Diseases. – 2020. – Т. 71. – №. 6. – С. 1367-1376.
6. Dupuis C. et al. Performance of repeated measures of (1–3)-β-d-glucan, mannan antigen, and antimannan antibodies for the diagnosis of invasive candidiasis in ICU patients: a preplanned ancillary analysis of the EMPIRICUS randomized clinical trial //Open forum infectious diseases. – US : Oxford University Press, 2021. – Т. 8. – №. 3. – С. ofab080.
7. Träger J. et al. Detailed β-(1→ 3)-D-glucan and mannan antigen kinetics in patients with candidemia //Journal of Clinical Microbiology. – 2023. – Т. 61. – №. 11. – С. e00598-23.
8. Valand N., Girija U. V. Candida pathogenicity and interplay with the immune system //Microbial Pathogenesis: Infection and Immunity. – 2021. – С. 241-272.
9. Wang K. et al. Diagnostic value of Candida mannan antigen and anti‐mannan IgG and IgM antibodies for Candida infection //Mycoses. – 2020. – Т. 63. – №. 2. – С. 181-188.

Правила подготовки к исследованию

После взятия кровь выдерживают при комнатной температуре 30 минут до полного образования сгустка, затем центрифугируют при 3000об/мин 10 минут для получения сыворотки/плазмы.

Образцы сыворотки/плазмы можно хранить при температуре +2…+8°С в течение 5 суток до исследования или при температуре -20°С (или -80°С). Допускается 5-кратное размораживание/оттаивание образцов сыворотки/плазмы. После размораживания образцы тщательно перемешивают перед тестированием.

Непригодны для исследования:

• образцы с содержанием альбумина более 60 г/л или общего белка более 120 г/л или связанного/несвязанного билирубина более 200 мг/л;
• липидные образцы, содержащие более 30 г/л триглицеридов или 5 г/л холестерина;
• гемолизированные образцы, содержащие гемоглобин более 2 г/л.

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Единицы измерения: pg/ml.

Референсные значения:

При проведении анализа образцов на наличие маннана Candida используют калибраторы. Результаты теста считают валидными, если ОП R4a>0,280 и ОП R0 < ОП R4a, а также соотношения:

ОП R4a / ОП R3 > 1,25

ОП R4c / ОП R4b >1,15

ОП R4b / ОП R4a > 1,15

ОП R4d / ОП R4c >1,20

Концентрация маннана в положительном контрольном образце R5 должна быть равна концентрации, указанной на пробирке, ±30%.

Формат представления результата

количественный.

Трактовка результатов исследования «Обнаружение маннанового антигена Candida в сыворотке/плазме человека иммуноферментным методом»

Отрицательно

Образцы крови с концентрацией маннана <62,5pg/ml. Отрицательный результат не исключает диагноз ИК. При наличии факторов риска следует проводить повторное тестирование клинического материала.

Сомнительно

62,5pg/ml ≤ концентрация маннана <125,0 pg/ml. Через 2-3недели исследование повторяют.

Положительно

Концентрация маннана ≥125,0 pg/ml. При концентрации выше 500,0 pg/ml следует сделать разведение 1/5 обработанного образца, а затем полученный результат умножить на 5.