Микобактерии туберкулеза (Mycobacterium tuberculosis complex), ДНК, количественное определение с последующим определением мутаций, связанных с лекарственной устойчивостью к рифампицину и изониазиду, методом ПЦР

Синонимы: Выявление микобактерий туберкулеза (МБТ) с оценкой резистентности к препаратам первой линии методом ПЦР; Тест на выявление микобактерий туберкулеза и лекарственную чувствительность (ТЛЧ).

Test for TB diagnosis with drug resistance detection by PCR.

Краткое описание исследования «Микобактерии туберкулеза (Mycobacterium tuberculosis complex), ДНК, количественное определение с последующим определением мутаций, связанных с лекарственной устойчивостью к рифампицину и изониазиду, методом ПЦР»

Исследование включает выявление и количественную оценку содержания ДНК микобактерий туберкулезного комплекса (Mycobacterium tuberculosis complex, который включает M. tuberculosis, M. bovis, M. africanum, M. microti, M. canetti, M. caprae, M. pinnepedii) в образцах биологического материала человека с последующим определением мутаций, ассоциированных с устойчивостью к лекарственным препаратам первой линии для адекватного выбора терапии.

Туберкулез – это хроническое инфекционное заболевание, вызываемое микобактериями туберкулеза, обычно поражает легкие, но может затронуть практически любой орган. Туберкулез представляет серьезную проблему и для российского здравоохранения, и во всем мире, где по статистике является ведущей причиной смерти от инфекционных заболеваний (наиболее распространенная форма – туберкулез легких).

Клинические проявления

Туберкулез возникает в результате размножения бактерий в организме и поражения различных органов. Болезнь имеет широкий спектр клинических проявлений, выраженность которых зависит от тяжести течения заболевания и распространенности процесса.

Характерные появления можно разделить на две категории:

• синдром интоксикации;
• симптомы поражения того или иного органа.

Симптомы туберкулеза могут оставаться слабо выраженными в течение многих месяцев. В результате этого больной может, сам того не подозревая, заражать других людей. У некоторых туберкулезных больных признаки заболевания отсутствуют. Распространенные симптомы туберкулеза:

• длительный кашель (иногда с кровью);
• боль в груди;
• слабость;
• повышенная утомляемость;
• снижение массы тела;
• лихорадка;
• ночная потливость.

Пути передачи инфекции

Наиболее опасной является аэрозольная взвесь, образующаяся в воздухе в присутствии пациента, выделяющего микобактерии туберкулеза во внешнюю среду, когда он кашляет, чихает, разговаривает (воздушно-капельный путь). В этом случае образуются мельчайшие капли диаметром 1-5 микрон, содержащие микроорганизмы. В составе этих капель возбудитель туберкулеза может успешно достигнуть глубоких отделов легких и реализовать свое патогенное действие.

Иные пути передачи инфекции:

• контактный – через предметы, которые использовал больной туберкулезом;
• воздушно-пылевой – с пылью помещений, в которых длительно находился пациент;
• алиментарный – через молочные продукты или мясо больных туберкулезом животных

реализуются редко.

В патогенезе туберкулеза различают два феномена:

• инфицирование;
• заболевание.

Инфицирование – это проникновение микобактерий туберкулеза в организм человека при отсутствии соответствующей клинической симптоматики и локальных проявлений.

Заболевание туберкулезом характеризуется появлением:

• морфологических;
• клинико-рентгенологических;
• микробиологических признаков патологии.

Пациент с туберкулезом никогда не выявляется в момент первичного инфицирования. От момента заражения до развития болезни может пройти от нескольких недель до нескольких лет. Лишь у небольшой части инфицированных людей развивается активная форма туберкулеза с симптоматическими проявлениями, у остальных инфекция может оставаться в латентном состоянии под контролем иммунной системы. Вероятность того, что у инфицированных людей разовьется заболевание и появятся симптомы туберкулеза, составляет примерно 5-10% (инфицированные, но не заболевшие туберкулезом люди не могут передавать заболевание).

Повышенному риску заболевания подвергаются:

• младенцы и дети;
• люди с нарушениями иммунной системы.

Туберкулез предотвратим и излечим. Лечение туберкулеза на ранней стадии может помочь остановить распространение инфекции и повысить шансы на выздоровление. Туберкулез обычно лечится антибиотиками, в отсутствие лечения может привести к летальному исходу.

Вакцинация против туберкулеза входит в национальный календарь прививок. Отсутствие вакцинации против туберкулеза повышает риск развития заболевания при первичном инфицировании.

Лекарственная устойчивость микобактерий туберкулеза

Важным свойством изменчивости микобактерий туберкулеза является формирование устойчивости к противотуберкулезным препаратам, которая закрепляется генетически. Это создало серьезную проблему общественного здравоохранения – распространение туберкулеза с множественной и широкой лекарственной устойчивостью микобактерий. Выявление ДНК микобактерий туберкулезного комплексе с последующим определением мутаций, ассоциированных с лекарственной устойчивостью к препаратам первого ряда важно для адекватного выбора терапии.

Лабораторные тесты для выявления микобактерий туберкулеза

Для лабораторной диагностики пациентам с подозрением на туберкулез рекомендуется проведение микробиологического (культурального) исследования, а также молекулярно-биологических исследований мокроты или иного диагностического материала:

• для лабораторной диагностики туберкулеза органов дыхания используют доступный для исследования материал – мокроту, бронхоальвеолярный лаваж, плевральную жидкость, соскоб эпителиальных клеток ротовой полости;
• больным с подозрением на внелегочный туберкулез возможно исследование иных видов биоматериала в соответствии с локализацией – например, мочи, эякулята, секрета простаты, синовиальной жидкости, ликвора.

Основными условиями правильной диагностики туберкулеза являются:

• комплексное обследование пациента;
• анализ результатов лабораторных и инструментальных методов исследования.

Диагноз считается верифицированным, если у пациента, наряду с клинико-лабораторными и рентгенологическими признаками туберкулеза, идентифицированы микобактерии туберкулеза любым микробиологическим или молекулярно-генетическим методом. При выявлении микобактерий туберкулеза без клинических, рентгенологических и лабораторных признаков заболевания требуется углубленное обследование с использованием инструментальных методов диагностики. Однократное выделение ДНК микобактерий молекулярно-генетическим методом при отсутствии других признаков заболевания требует динамического наблюдения за пациентом.

С какой целью проводят определение ДНК микобактерий туберкулеза с последующим определением наличия мутаций лекарственной устойчивости

Поскольку режимы химиотерапии туберкулеза основаны на лекарственной устойчивости и чувствительности возбудителя, очень важно перед назначением лечения проводить тест на лекарственную чувствительность (ТЛЧ) микобактерий туберкулеза.

Материал для исследования

Мокрота.

Бронхоальвеолярный лаваж.

Плевральная жидкость.

Соскоб эпителиальных клеток ротовой полости.

Синовиальная жидкость.

Ликвор.

Литература

1. Клинические рекомендации. Туберкулез у детей. МЗ РФ. – 2024.
2. Клинические рекомендации. Туберкулез у взрослых. МЗ РФ. – 2024.
3. World Health Organization. WHO consolidated guidelines on tuberculosis. Module 3: Diagnosis. – World Health Organization, 2025.
4. Материалы фирмы-производителя реагентов.

Правила подготовки к исследованию

Условия подготовки определяет лечащий врач.

См. инструкцию по сбору биоматериала. 

В каких случаях проводят анализ «Микобактерии туберкулеза (Mycobacterium tuberculosis complex), ДНК, количественное определение с последующим определением мутаций, связанных с лекарственной устойчивостью к рифампицину и изониазиду, методом ПЦР»:

• в комплексе с другими методами исследования при обследовании пациентов с туберкулезом и при подозрении на туберкулез с целью быстрого выявления и своевременного назначения терапии;
• пациентам с ранее подтвержденным наличием микобактерий туберкулеза в биоматериале для выявления мутаций лекарственной устойчивости микобактерий туберкулеза и адекватного выбора терапии.

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Единицы измерения:

ДНК Mycobacterium tuberculosis complex – ГЭ/мл (геном-эквиваленты/мл).

Мутации, связанные с устойчивостью к рифампицину – в качественном формате (обнаружено/не обнаружено).

Мутации, связанные с устойчивостью к изониазиду – в качественном формате (обнаружено/не обнаружено).

Референсные значения: не обнаружено.

Интерпретация результатов исследования на Микобактерии туберкулеза (Mycobacterium tuberculosis complex), ДНК, количественное определение с последующим определением мутаций, связанных с лекарственной устойчивостью к рифампицину и изониазиду, методом ПЦР

Клиническую интерпретацию проводит лечащий врач с учетом клинической ситуации, анамнеза, результатов других лабораторных и инструментальных исследований.